Das mittlerer Stuart Es ist ein halbfester Agar oder eine Brühe ohne Nährstoffe, die für den Transport biologischer Proben verwendet wird. Ihr Zweck ist es, die in der Probe vorhandenen Stämme für eine bestimmte Zeit lebensfähig zu halten, ohne jedoch die mikrobielle Population zu erhöhen.
Es wurde 1948 von Moffet, Young und Stuart erstellt und später von Toshach und Patsula modifiziert. Es besteht aus Natriumglycerophosphat, Natriumthioglykolat, Calciumchlorid und Agar-Agar. Letzteres ist im halbfesten Medium vorhanden und fehlt in der Flüssigkeit. Einige Labors fügen Methylenblau hinzu.
Sie werden in der Regel verwendet, wenn die Probe nicht sofort gesät werden kann. In diesem Fall wird die Probe in das Transportmedium gegeben, während sie in das Labor überführt wird, das die Kultur verarbeitet..
Auf diese Weise wird garantiert, dass die vorhandenen Mikroorganismen am Leben bleiben, bis sie in die entsprechenden Kulturmedien geimpft werden..
Ursprünglich sollte es Harnröhren- oder Vaginalproben transportieren, bei denen das Vorhandensein von Neisseria gonorrhoeae. Später erkannten sie, dass seine Nützlichkeit breiter sein könnte.
Das Stuart-Medium erwies sich als sehr wirksam bei der Konservierung labiler und anspruchsvoller Mikroorganismen wie z Neisseria Meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertussis, unter anderen. Neben anderen nicht störenden Mikroorganismen wie Enterobakterien.
Das Stuart-Medium vermeidet grundsätzlich das Austrocknen der Probe, hält das osmotische Gleichgewicht aufrecht und hält die Mikroorganismen auf einem idealen pH-Wert. Andererseits enthält dieses Medium strategisch gesehen keine Nährstoffe, wodurch verhindert wird, dass sich Mikroorganismen vermehren.
Auf dem Markt gibt es spezielle Probentransportvorrichtungen, die dieses oder ein anderes Transportmittel enthalten, das als Kulturette bezeichnet wird. Sie können auch im Labor hergestellt werden.
Artikelverzeichnis
Der Zweck des Stuart-Transportmittels besteht darin, die Proben bis zur Verarbeitung so nahe wie möglich an ihrem ursprünglichen Zustand zu halten..
Natriumglycerophosphat und Calciumchlorid sind ein Puffersystem, das den pH-Wert und die Osmolarität aufrechterhält..
Währenddessen wirkt Natriumthioglycollat als Reduktionsmittel und im Falle des Enthaltens von Agar ergibt dies eine halbfeste Konsistenz, um die Sauerstoffanreicherung des Mediums zu verzögern. Schließlich ist Methylenblau ein Oxidationsindikator, dh es erkennt das Vorhandensein von Sauerstoff.
Das halbfeste Medium mit Redoxindikator ist ideal für den Transport von Proben, bei denen der Verdacht auf anaerobe Bakterien besteht.
Das Stuart-Medium erfüllt wie alle Transportmittel bestimmte Eigenschaften, darunter:
-Erhält lebensfähige mikrobielle Stämme, die vorhanden sind, ohne sich zu vermehren.
-Enthält keine Nährstoffe; Seine Verbindungen zielen darauf ab, die Probe unter angemessenen Bedingungen von pH und Osmolarität hydratisiert zu halten.
-Hemmt die Autolyse einiger empfindlicher Mikroorganismen wie Pneumococcus.
-Seine Verwendung ist vorübergehend, es sollte nicht zu lange verlängert werden.
Natriumglycerophosphat 10 gr
Natriumthioglycollat 1,0 gr
Calciumchlorid 0,1 gr
Methylenblau 0,002 gr
Agar-Agar 3 gr
Destilliertes Wasser 1 L.
Mischen Sie die Komponenten und erhitzen Sie sie, bis sie vollständig aufgelöst sind. In Röhrchen oder spezielle Tupfer gießen. Sie werden in den Autoklaven eingeführt und 15 Minuten bei 121 ° C sterilisiert. Lassen Sie die Röhrchen aufrecht abkühlen (in Form eines Stopfens). Bei Raumtemperatur aufbewahren.
14,1 g des Mediums werden in 1 Liter destilliertem Wasser gewogen. Unter häufigem Rühren erhitzen, bis es vollständig aufgelöst ist. Es kann gekocht werden. Der Rest des Verfahrens wie bereits beschrieben.
Das dehydrierte Medium ist cremefarben und sollte auf seiner Oberfläche blau sein. Dies ist auf das Vorhandensein von Methylenblau zurückzuführen.
Der pH-Wert des Mediums muss auf 7,4 ± 0,2 eingestellt werden
Zutaten
Natriumglycerophosphat 10 gr
Natriumthioglycollat 1 gr
Calciumchloriddihydrat 0,1 g
Destilliertes Wasser 1000 ml
Es hat die gleichen Inhaltsstoffe wie das halbfeste, aber es hat keinen Agar oder Methylenblau. In diesem Fall werden die Komponenten ohne Erhitzen gemischt und 0,5 ml werden in 16 x 125 mm großen Röhrchen mit Schraubverschlüssen verteilt..
Es wird in einem Autoklaven 10 Minuten bei 121 ° C sterilisiert. Für die Probenahme sollten Dacron-Tupfer verwendet werden, wenn die Probe für die PCR bestimmt ist, oder Rayon, wenn sie für die Kultur bestimmt ist.
Die Röhrchen werden bei Raumtemperatur gelagert.
Im Handel gibt es spezielle Probentransportvorrichtungen, die als Kulturette bezeichnet werden. Dieses Gerät ist ein längliches und dünnes Rohr mit einem Tupfer im Inneren und am Ende befindet sich ein Segment, das das halbfeste oder flüssige Stuart-Medium enthält.
Das Gerät wird geöffnet und die Probe mit dem Tupfer entnommen. Es wird dann wieder in das Rohr eingeführt, bis die Spitze des Tupfers in das halbfeste Transportmedium eingeführt ist; Einige bringen einen mit flüssigem Stuart-Medium imprägnierten Polyurethanschwamm mit, mit dem die Probe konserviert wird, indem sie feucht gehalten wird.
Bei Verdacht auf empfindliche Mikroorganismen sollten zur Entnahme der Probe Wattestäbchen mit Holzkohle verwendet werden..
Die Proben, die mit Tupfern oder Tupfern entnommen und in dieses Medium übertragen werden können, sind Rachenexsudate, Rektaltupfer und verschiedene Sekrete, einschließlich: Vaginal-, Harnröhren-, Wund-, Augen-, Ohr- und Abszess..
Während der Übergabe der Probe im Transportmedium an das Labor muss vermieden werden, dass das Medium extremen Umgebungsbedingungen (zu kalt oder zu heiß) ausgesetzt wird. Plötzliche Änderungen des Luftdrucks sollten ebenfalls vermieden werden.
Die Zeit, in der das Medium in der Lage ist, einen Mikroorganismus lebensfähig zu halten, hängt von dem betreffenden Stamm ab. Beispielsweise können Mikroorganismen der Gattungen Neisserias und Haemophilus bis zu 24 Stunden lebensfähig bleiben, Stämme wie Salmonella oder Shigella können jedoch Tage und sogar Wochen dauern..
Wenn geschätzt wird, dass die Verarbeitung der Probe länger als 4 Tage dauern kann, ist es vorzuziehen, die Probe bei -70 ° C einzufrieren.
Das vorbereitete Transportmittel oder die kommerzielle Kulturette müssen mit einem Etikett versehen sein, auf dem die folgenden Informationen angebracht werden:
Vor- und Nachname des Patienten: Vermeiden Sie Probenverwechslungen.
Identifikationsnummer: Es ist bequem, eine Bestellung bei der Arbeit zu halten.
Beispielsammelquelle: hilft dem Bakteriologen bei der Auswahl der geeigneten Kulturmedien.
Behandelnder Arzt: Manchmal ist es für mögliche Konsultationen notwendig.
Datum und Uhrzeit der Probenahme: Es ist für die Annahme oder Ablehnung der Probe entsprechend der Zeit erforderlich, die zwischen der Entnahme der Probe und dem Empfang im Labor verstrichen ist..
Weitere Informationen, deren Anhängen sehr nützlich wäre, sind:
Die vermutliche Diagnose: Leitfäden bei der Hinzufügung spezieller Kulturmedien nach diagnostischem Verdacht.
Antibiotikabehandlung: Es ist nützlich, an das Antibiogramm angehängt zu werden.
All diese Informationen sind wichtig, um eine gute Verarbeitung der Probe zu gewährleisten..
Um die Leistung des Stuart-Mediums zu bewerten, können bekannte Stämme inokuliert und bei 25 ° C gehalten werden, wie z. Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Meningokokken ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.
In allen Fällen wird erwartet, dass der betreffende Mikroorganismus wiederhergestellt wird, der 24 Stunden lang aufbewahrt wird..
Andererseits können andere Stämme verwendet werden, wie zum Beispiel: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 und Escherichia coli ATCC 11775.
In allen Fällen wird eine reichliche Erholung für bis zu 96 Stunden erwartet..
Einige Studien stellen sicher, dass das im Stuart-Medium vorhandene Glycerophosphat von einigen Coliformen, unter anderen gramnegativen Bakterien, metabolisiert werden kann und sich daher in diesem Medium vermehrt..
Dieses Risiko steigt, je länger sich die Probenverarbeitung verzögert. Ebenso beeinflusst die Exposition des Stuart-Mediums gegenüber hohen Temperaturen während seiner Übertragung dies besonders.
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